細胞培養(yǎng)需要用到哪些設備？

細胞在培養(yǎng)時需要用到的常用基本設備

1,顯微鏡：倒置顯微鏡——是組織細胞培養(yǎng)室所必需的日常工作常規(guī)使用設備之一，便于掌握細胞的生長情況并觀察有無污染等。

——若有條件，尚可配置自動化細胞計數儀帶有照相系統(tǒng)的高質量相差顯微鏡、解剖顯微鏡、熒光顯微鏡、錄像系統(tǒng)或縮時電影拍攝裝置等，以便隨時觀察、記錄、攝影細胞生長情況。

2, 培養(yǎng)箱：體外培養(yǎng)的細胞和體內細胞一樣，需要在恒定的溫度下生存，大多數情況下，最適溫度是37℃，溫差變化一般不應超過±0.5℃，細胞在溫度升高2℃時，持續(xù)數小時即不能耐受，40℃以上將很快死亡。因此需要有能控制溫度的培養(yǎng)箱，如具有較高靈敏度的恒溫培養(yǎng)箱及CO2培養(yǎng)箱。

恒溫培養(yǎng)箱——應選隔水式或晶體管自控溫培養(yǎng)箱，此類培養(yǎng)箱靈敏度高，溫度控制較穩(wěn)定。一般的恒溫培養(yǎng)箱價格較便宜，其缺點是只宜于作密閉式培養(yǎng)。

CO2培養(yǎng)箱——目前多數的細胞培養(yǎng)室已廣泛使用。CO2培養(yǎng)箱的優(yōu)點是能夠提供進行細胞培養(yǎng)時所需要的一定量的CO2（常用濃度為5％），易于使培養(yǎng)液的pH保持穩(wěn)定，適用于開放或半開放培養(yǎng)。培養(yǎng)細胞的器皿可用培養(yǎng)皿、培養(yǎng)板或培養(yǎng)瓶；當使用培養(yǎng)瓶時，可將瓶蓋略微旋松，使培養(yǎng)瓶內與外界保持通氣狀態(tài)。由于這種培養(yǎng)方法培養(yǎng)器皿內部與外界相通，培養(yǎng)箱內空氣必須保持清潔，應定期以紫外線照射或酒精消毒。同時培養(yǎng)箱應放置盛有無菌蒸餾水的水槽，防止培養(yǎng)液蒸發(fā)，使箱內相對濕度始終保持為100％。

3,干燥箱：用于細胞培養(yǎng)箱的有些器械、器皿需要烘干后才能使用，玻璃器皿等須干熱消毒。干熱消毒時，電熱干燥箱升溫較高，一般需達到160℃以上。通常使用鼓風式電熱干燥箱。其優(yōu)點是溫度均勻、效果較好，缺點是升溫過程較慢。升溫時不能先升溫后鼓風而應鼓風與升溫同時開始，至100℃時，停止鼓風，應避免包裹器皿的紙或棉花燒焦，燒焦的碎屑可影響細胞的生長。消毒后，不能立即打開箱門以免驟冷而導致玻璃器皿損壞，應等候溫度自然下降至100℃以下方可開門。

4,水純化裝置：細胞培養(yǎng)對水的質量要求較高，細胞培養(yǎng)以及與細胞培養(yǎng)工作相關的液體的配制用水必須事先嚴格純化處理。水純化時可采用離子交換裝置或蒸餾器。離子交換純水尚不能有效去除有機物，因此用水時尚需再次蒸餾。進行細胞培養(yǎng)時配制各種培養(yǎng)液及試劑等均需使用三次蒸餾水：即使是用于玻璃器皿的沖洗，也應使用二次以上蒸餾水。

5,冰箱：細胞培養(yǎng)室必須配備

○a普通冰箱或冷藏柜

——儲存培養(yǎng)液、生理鹽水、Hank’s液試劑等培養(yǎng)用的物品及短期保存組織標本。

○b低溫冰箱（-20℃）、超低溫冰箱

——用于儲存需要冷凍保存生物活性及較長時期存放的制劑，如酶、血清等。

——細胞培養(yǎng)室的冰箱應屬專用，不得存放易揮發(fā)、易燃燒等對細胞有害的物質，且應保持清潔。

6,細胞冷凍儲存器：儲存器常用的是液氮容器。根據使用需要分為不同的類型及多種規(guī)格。選擇購置液氮容器時要綜合考慮容積大小，取放使用方便及液氮揮發(fā)量（經濟）三種因素。液氮容器的大小可自25L～500L，可以儲存1ml的安瓿250～15000個左右。液氮溫度可低達-196℃，使用時應防止凍傷。由于液氮不斷揮發(fā)，應注意觀察存留液氮情況，及時定期補充液氮，避免揮發(fā)過多而致細胞受損。

另外，多種規(guī)格的先進液氮運輸，供應罐系列不僅移動方便，還可通過連接管給儲存罐補充液氮，提高工作效率，保證樣品安全。

7,離心機：進行細胞培養(yǎng)時，常規(guī)需要進行制備細胞懸液、調整細胞密度、洗滌、收集細胞等工作，通常需要使用離心機。

○a一般可常規(guī)配置4000rpm的國產臺式離心機，例如細胞沉降，使用80～100g的離心機即可，離心力過大有時可能引起細胞的損傷。

○b另外，可根據需要添置其他類型如大容量或可調節(jié)溫度的離心機等

○c若需特殊用途，例如某些細胞的分離制備需梯度離心，則需另行配置實驗所需的具備其他特殊功能的離心機。

8,天平：常用的有扭力天平、精密天平及各種電子天平。

分析天平的感量為0.1mg、0.01mg和0.001mg。根據稱取物質的量和稱量精度的要求，選擇適宜級別的天平。要求精密稱定時，當取樣量大于100 mg 選用感量為0.1mg天平，在100－10 mg 選用感量為0.01mg 天平，小于10mg選用感量為0.001 mg天平 。

9,消毒器：直接或間接與細胞接觸的物品均需消毒滅菌處理。

常用：○a手提式高壓蒸汽消毒器

○b目前市場上，具有高效、安全、方便等性能，適用于各種器皿、液體、培養(yǎng)基的高壓滅菌裝置已在流通（如脈動真空滅菌器）。可供使用者在滅菌的同時監(jiān)測滅菌容器內的壓力和溫度，確保滅菌質量和安全，并可通過記憶（儲存）支持系統(tǒng)改變各種參數（例如滅菌、排氣、加熱等參數），即使在進行滅菌時發(fā)生停電故障，仍可保留所設定的參數

10,濾器：目前細胞培養(yǎng)工作中采用的培養(yǎng)用液，包括人工合成培養(yǎng)液、血清、消化用胰酶等常含有維生素、蛋白、多肽、生長因子等物質，這些物質在高溫或射線照射下易發(fā)生變性或失去功能，因而上述液體多采用濾過消毒以除去細菌。