流式細胞儀的應(yīng)用之——醫(yī)院檢驗科

       醫(yī)院檢驗科的急診窗口，始終面臨 “時間緊、需求急” 的壓力 —— 急診樣本多來自重癥、急性血液病癥、移植后監(jiān)測等場景，檢測結(jié)果的出具速度直接關(guān)系到臨床醫(yī)生的診療決策，甚至影響患者預(yù)后。流式細胞儀作為可快速分析細胞特性的設(shè)備，在急診樣本檢測中扮演著重要角色。通過優(yōu)化樣本處理、儀器設(shè)置、數(shù)據(jù)分析及流程銜接等環(huán)節(jié)，流式細胞儀能有效壓縮急診樣本的檢測周期，為急診診療爭取更多時間。

一、樣本預(yù)處理：簡化流程，減少 “等待時間”

急診樣本的檢測效率，從樣本接收后的預(yù)處理階段就已開始影響。傳統(tǒng)細胞分析的預(yù)處理步驟多（如多次離心、梯度分離），耗時較長，而針對急診場景，流式細胞儀的樣本預(yù)處理可通過 “簡化步驟、定向去雜” 實現(xiàn)提速，同時保證檢測所需的樣本質(zhì)量。

急診樣本（如外周血、骨髓液）需先制成單細胞懸液才能上樣檢測，若細胞聚集導(dǎo)致檢測中斷或數(shù)據(jù)偏差。檢驗科可針對急診樣本采用 “一步過濾法”：使用 30-40μm 孔徑的一次性濾膜直接過濾樣本，無需反復(fù)離心吹打，1-2 分鐘內(nèi)即可去除細胞團塊與大顆粒雜質(zhì)，獲得符合流式檢測要求的單細胞懸液。例如處理急性白血病患者的骨髓樣本時，傳統(tǒng)方法需離心 3 次（約 15 分鐘），而 “一步過濾法” 只需 2 分鐘，大幅縮短預(yù)處理時間。

部分急診樣本（如膿毒癥患者的外周血）中含有大量死細胞或細胞碎片，會釋放非特異性熒光，干擾檢測結(jié)果，且可能堵塞儀器進樣針。針對這類樣本，可采用 “快速死細胞消除方案”：在樣本中加入即用型死細胞染料（如 7-AAD），同時搭配短時間低速離心（500×g，3 分鐘），利用密度差異分離死細胞與活細胞，無需額外添加分離液。這種方法可在 5 分鐘內(nèi)去除 80% 以上的死細胞，既減少干擾，又避免復(fù)雜操作導(dǎo)致的時間浪費，確保樣本快速進入檢測環(huán)節(jié)。

急診樣本的標(biāo)記環(huán)節(jié)（如熒光抗體標(biāo)記細胞標(biāo)志物），傳統(tǒng)操作需逐一添加多種抗體，步驟繁瑣且易出錯。檢驗科可提前將急診高頻檢測項目（如 T 細胞亞群、相關(guān)標(biāo)志物）的抗體預(yù)混為 “一站式試劑”—— 例如將 CD3-FITC、CD4-PE、CD8-APC 三種抗體按比例混合，制成 “TBNK 檢測預(yù)混液”。檢測時只需向樣本中加入單一預(yù)混試劑，室溫孵育 10 分鐘即可完成標(biāo)記，較傳統(tǒng)分步加樣節(jié)省 5-8 分鐘，且減少人為操作誤差。

二、儀器設(shè)置：預(yù)設(shè)方案，縮短 “檢測準(zhǔn)備時間”

流式細胞儀的檢測參數(shù)設(shè)置（如激光波長、熒光通道、流速控制）若每次都需重新調(diào)整，會明顯延長急診樣本的檢測周期。通過針對急診高頻項目預(yù)設(shè) “標(biāo)準(zhǔn)化檢測方案”，并優(yōu)化儀器硬件配置，可讓儀器快速進入檢測狀態(tài)，減少準(zhǔn)備環(huán)節(jié)的耗時。

檢驗科可梳理急診流式檢測的高頻項目（如急性白血病細胞分型、免疫細胞活化狀態(tài)監(jiān)測、指數(shù)檢測），在流式細胞儀中提前儲存對應(yīng)的檢測方案。例如針對 “急性白血病分型”，預(yù)設(shè) 488nm 激光激發(fā) CD45-FITC、CD33-PE、CD19-APC，640nm 激光激發(fā) CD3-PE-Cy7 等通道參數(shù)，同時設(shè)置固定的進樣流速（如 30μL/min）與檢測細胞數(shù)量（如 100000 個細胞）。當(dāng)急診接收這類樣本時，操作人員無需重新調(diào)整參數(shù)，只需調(diào)用預(yù)設(shè)方案，2 分鐘內(nèi)即可啟動檢測，較重新設(shè)置參數(shù)節(jié)省 10-15 分鐘。

急診樣本需快速完成數(shù)據(jù)采集，流式細胞儀的進樣系統(tǒng)可通過 “高速穩(wěn)定進樣” 提升效率。例如選用支持自動進樣器的流式儀，急診樣本無需手動更換試管，儀器可自動吸取樣本并完成上樣；同時將進樣流速調(diào)整至 “急診模式”（如 50μL/min），每秒可分析 5000-8000 個細胞，較常規(guī)流速（30μL/min）提升 40% 以上。以一份含 50 萬個細胞的急診樣本為例，常規(guī)流速需 17 分鐘完成檢測，“急診模式” 下只需 10 分鐘，大幅縮短數(shù)據(jù)采集時間。

急診樣本檢測怕因儀器狀態(tài)異常導(dǎo)致數(shù)據(jù)無效，需重新檢測。檢驗科可在流式細胞儀中設(shè)置 “急診樣本實時質(zhì)控” 功能：每次啟動急診檢測前，儀器自動用標(biāo)準(zhǔn)熒光微球進行質(zhì)控驗證，1 分鐘內(nèi)完成激光強度、探測器靈敏度、熒光通道穩(wěn)定性的校驗，確保儀器處于正常狀態(tài)。若質(zhì)控不通過，儀器會自動提示故障點（如激光功率不足、濾光片偏移），操作人員可快速排查修復(fù)，避免因儀器問題導(dǎo)致樣本重復(fù)檢測，節(jié)省額外的 15-20 分鐘。

三、數(shù)據(jù)分析：自動化處理，壓縮 “報告生成時間”

急診樣本的檢測效率，不只取決于樣本檢測速度，還與數(shù)據(jù)分析、報告生成的速度密切相關(guān)。傳統(tǒng)流式數(shù)據(jù)分析需人工圈選細胞亞群、計算比例、核對結(jié)果，耗時較長，而通過自動化分析軟件與標(biāo)準(zhǔn)化報告模板，可明顯縮短這一環(huán)節(jié)的時間。

流式分析軟件可針對急診高頻項目設(shè)置 “自動圈門模板”：例如分析 T 細胞亞群時，軟件自動根據(jù) FSC-SSC 散點圖圈選淋巴細胞群體，再基于 CD3、CD4、CD8 的熒光信號，自動劃分 CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8 + 細胞亞群，并計算各亞群占比，無需人工手動圈選。以 TBNK 檢測為例，傳統(tǒng)人工分析需 8-10 分鐘，自動化分析只需 2-3 分鐘，且數(shù)據(jù)計算的一致性更高，避免人為判斷差異導(dǎo)致的時間消耗。

檢驗科可根據(jù)急診臨床需求，在分析軟件中預(yù)設(shè) “急診報告模板”—— 模板中已包含檢測項目名稱、參考范圍、結(jié)果解讀框架（如 “CD4 + 細胞比例降低提示免疫功能下降”），數(shù)據(jù)分析完成后，軟件自動將結(jié)果填入模板，生成初步報告。操作人員只需核對數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性，無需重新排版或撰寫解讀內(nèi)容，3-5 分鐘內(nèi)即可完成報告審核并提交給臨床，較傳統(tǒng)手動撰寫報告節(jié)省 10-12 分鐘。

針對急診樣本中可能出現(xiàn)的異常結(jié)果（如急性白血病的異常細胞比例升高、時 CD64 指數(shù)異常），軟件可設(shè)置 “自動預(yù)警功能”：當(dāng)檢測結(jié)果超出參考范圍時，軟件自動用紅色標(biāo)注異常項，并彈出 “需重點審核” 提示，同時關(guān)聯(lián)歷史檢測數(shù)據(jù)（若患者有既往流式檢測記錄），幫助操作人員快速判斷結(jié)果是否合理。這種預(yù)警機制可減少異常結(jié)果的審核時間，避免因遺漏異常信息導(dǎo)致報告延遲，確保臨床醫(yī)生及時獲取關(guān)鍵信息。

四、流程銜接：多環(huán)節(jié)協(xié)同，避免 “時間斷層”

急診樣本的檢測效率提升，需檢驗科內(nèi)部、檢驗科與急診科室之間的流程協(xié)同，避免因樣本傳遞、信息溝通不暢導(dǎo)致的時間斷層。流式細胞儀的應(yīng)用可與這些流程深度結(jié)合，形成 “快速響應(yīng)鏈條”。

檢驗科可建立 “急診樣本綠色通道”：急診樣本接收后，通過 LIS 系統(tǒng)（實驗室信息系統(tǒng)）自動標(biāo)記 “急診優(yōu)先級”，流式檢測崗位優(yōu)先處理這類樣本，即使存在常規(guī)樣本排隊，也可插入急診樣本檢測，避免急診樣本等待常規(guī)樣本完成后再檢測。例如當(dāng)流式儀正在檢測常規(guī)樣本時，急診樣本到達后，儀器可暫停常規(guī)樣本檢測（保留已采集數(shù)據(jù)），優(yōu)先啟動急診樣本檢測，待急診樣本完成后繼續(xù)常規(guī)樣本檢測，確保急診樣本從接收至檢測啟動的時間不超過 10 分鐘。

檢驗科可通過 LIS 系統(tǒng)與急診科室的 HIS 系統(tǒng)（醫(yī)院信息系統(tǒng)）聯(lián)動：急診醫(yī)生開具流式檢測申請后，檢驗科實時接收申請信息，提前準(zhǔn)備對應(yīng)的預(yù)混試劑與預(yù)設(shè)方案；當(dāng)流式檢測完成、報告審核通過后，報告自動同步至急診科室的 HIS 系統(tǒng)，急診醫(yī)生可立即查看結(jié)果，無需等待檢驗科人工通知。這種信息同步機制可減少信息傳遞的時間損耗，避免因 “等待通知” 導(dǎo)致的診療延遲，讓臨床醫(yī)生在報告生成后 1-2 分鐘內(nèi)獲取結(jié)果。

針對急診樣本的隨機性，檢驗科可調(diào)整流式檢測崗位的人員排班：在急診樣本高發(fā)時段（如夜間、節(jié)假日），安排具備流式操作資質(zhì)的人員在崗，確保急診樣本到達后能立即處理，無需等待人員到崗；同時對在崗人員進行 “急診流程專項培訓(xùn)”，使其熟練掌握樣本快速預(yù)處理、儀器預(yù)設(shè)方案調(diào)用、自動化數(shù)據(jù)分析等技能，避免因人員操作不熟練導(dǎo)致的時間浪費。

在醫(yī)院檢驗科的急診樣本檢測中，流式細胞儀并非單純依靠 “高速度” 提升效率，而是通過樣本預(yù)處理的簡化、儀器預(yù)設(shè)方案的優(yōu)化、數(shù)據(jù)分析的自動化，以及多環(huán)節(jié)流程的協(xié)同，形成 “快速響應(yīng)閉環(huán)”。這種優(yōu)化不只壓縮了單個環(huán)節(jié)的耗時，更避免了環(huán)節(jié)間的時間斷層，讓急診樣本從接收至報告輸出的全流程更順暢。未來，隨著流式技術(shù)與實驗室信息化、自動化的深度融合，急診樣本的檢測效率還將進一步提升，為急診診療提供更有力的支撐。